Welcome _ANONYMOUS!
Time: 05:32
Суббота, 19 августа 2017 г.
Главное Меню
· Главная
· Лаборатории
· Наши разработки
· БД "BioLumbase" природные
· БД "BioLumbase" трансгенные
· Каталог штаммов
· Публикации

· Контактная информация

· FAQ
· Web-ссылки

Биолюминесценция
· Основы биолюмиинесценции
· Биолюминесценция в науке
· Биолюминесценция в образовании
· Прикладная биолюминесценция

Now on-line
Сейчас, 10 гостей и 0 посетителей онлайн..

Вы анонимный пользователь.


Language of interface
Выберите язык интерфейса:


Log in
 





Регистрация


 

Микробиосенсоры
.: Дата публикации 11-Янв-2005 :: Просмотров: 1145 :: Печатать текущую страницу :: Печатать все страницы:.
Untitled Document
 

Биолюминесценция бактерий обеспечивается системой специализированных ферментов, связанных с общим метаболизмом бактериальных клеток. Поэтому воздействие на целые клетки физических факторов и большого спектра химических веществ быстро отражается на интенсивности свечения. Биолюминесцентная реакция выделенных ферментов также чувствительна к ингибиторам и активаторам как самих ферментов, так и их субстратов. Исходя из этих предпосылок на основе лиофилизированных светящихся бактерий и выделенной из них люциферазной ферментной системы предложен ряд методов экспрессного биолюминесцентного анализа для медицины, контроля состояния природной среды и управления биотехнологическими процессами.

Эти методы относятся к группе биотестов, и характеризуют общую токсичность среды. Функциональная принадлежность методов - сигнальные тесты, быстро реагирующие на появление токсичности среды. Основные их преимущества - быстрота (время анализа 1-3 мин), высокая чувствительность (для различных классов соединений от 10-3 до 10-12 М), дешевизна реагентов и приборов для анализа. В лаборатории бактериальной биолюминесценции Института биофизики СО РАН разработан базовый интегральный биотест на основе лиофилизированных светящихся бактерий для мониторинга природной среды. Разработана технология получения комплектов реактивов для биолюминесцентного анализа (КРАБов) из ферментов люминесцентной реакции люциферазы и НАДН-ФМН-оксидопедуктазы (Биотесты). Разработан прибор люминометр (совместного производства ИБФ СО РАН и СКТБ "Наука") различных модификаций для биолюминесцентного анализа (Приборы).

Практическое использование биолюминесцентных биотестов возможно:
в экологическом мониторинге для определения интегральной токсичности природных водных источников (реки, озера), водозаборов, сточных вод, тестирования тяжелых металлов, фенольных соединений, пестицидов и т.д., для непрерывного экспресс-контроля состояния окружающей среды промышленных районов и природно-хозяйственных комплексов, контроля во время аварий и залповых вредных выбросов предприятий, экологической паспортизации предприятий и отдельных районов.

Производство биотеста и КРАБов не имеет вредных токсичных отходов и побочных продуктов. В России производство биолюминесцентных биотестов на основе лиофилизированных люминесцентных бактерий, как и производство комплектов реактивов для биолюминесцентного анализа отсутствует.

Биотесты на основе лиофилизированных бактерий (Микробиосенсоры)
В настоящее время при осуществлении экологического контроля используется не менее 2-х стандартных методов биотестирования с тест-организмами из разных систематических групп (бактерии, водоросли, беспозвоночные, рыбы). Имеющиеся интегральные биотесты с использованием живых организмов (парамеций, водорослей, дафний, рыб и т.д.) имеют ряд недостатков (трудоемкость, плохая воспроизводимость результатов, длительность анализа, трудности количественной оценки). Бактериальная биолюминесценция обладает высокой чувствительностью к действию различных ингибиторов биологической активности. Известно влияние на светящиеся бактерии многих анестетиков, промышленных ядов, инсектицидов, пестицидов, отравляющих и лекарственных веществ. Отсутствие специфичности делает перспективным применение светящихся бактерий в экологическом мониторинге, где по воздействию на живые бактерии определяется токсичность суммы вредных веществ. Простота измерения люминесценции, экспрессность метода, возможность автоматизации измерений и статистической обработки данных обеспечивает светящимся бактериям несомненное преимущество по сравнению с другими биологическими тестами. Длительность анализа при использовании лиофилизированных бактерий составляет 10-30 минут, в то время как другие биотесты требуют 48-96 часов.

Разработаны биотесты на основе лиофилизированных светящихся бактерий вида Photobacterium phosphoreum "Микробиосенсор В17-677F" и рекомбинантного светящегося штамма E.coli "Микробиосенсор ЕСК", которые были использованы для исследования загрязнения вод рек Енисея, Кана, Ангары и их притоков в местах водозаборов, промышленных сбросов, сточных вод ЦБК, а также экологической экспертизы водозаборов и природных источников населенных пунктов Алтайского края.

Микробиосенсор В17-677F -комплект биотеста
на основе лиофилизированных светящихся бактерий P.phosphoreum

Совместно с краевым комитетом охраны природы проведено определение токсичности возвратных и сточных вод предприятий г.Красноярска и некоторых городов края.

Биотестирование загрязнения воды реки Eнисей
(на расстоянии 350 км ниже г.Красноярска)

Аналогичный метод с использованием препарата лиофилизированных люминесцентных бактерий применяется за рубежом для оценки качества вод рек и озер). Разрабатываемый в ИБФ биолюминесцентный биотест сравним по всем параметрам с препаратом "Microtox" фирмы AZUR Environmental (ранее фирмы Beckman), надежен в работе и более доступен потребителям.
В комплект биотеста входит 10 флаконов лиофилизированных бактерий. Один флакон биотеста может быть использован для измерения 100 проб. Биотест надежно сохраняет активность при хранении в холодильнике (0 - +5о) в течение полугода, при хранении в морозильной камере (-18о) – в течение 1 – 1,5 года.

Биотест на основе лиофилизированных светящихся бактерий получил положительную оценку специалистов и включен в рекомендуемые методы экологического мониторинга, в 2002 году получил сертификат Государственного Комитета РФ по стандартизации и метрологии за № 224.01.13.194/2002.

 

 

Сертификат об аттестации методики определения токсичности водных образцов с помощью биолюминесцентного биотеста на основе лиофилизированных светящихся бактерий P.phosphoreum
 
.: Вернуться в документ Наши разработки :: Вернуться в меню Документов :.
 

Laboratory of Bacterial Bioluminescence © 2004-2013
This site is supported by a grant № 05-07-90157b from the Russian Foundation for Basic Researches
Insitute of Biophysics SB RAS

Яндекс цитирования