Welcome _ANONYMOUS!
Time: 05:34
Суббота, 19 августа 2017 г.
Главное Меню
· Главная
· Лаборатории
· Наши разработки
· БД "BioLumbase" природные
· БД "BioLumbase" трансгенные
· Каталог штаммов
· Публикации

· Контактная информация

· FAQ
· Web-ссылки

Биолюминесценция
· Основы биолюмиинесценции
· Биолюминесценция в науке
· Биолюминесценция в образовании
· Прикладная биолюминесценция

Now on-line
Сейчас, 11 гостей и 0 посетителей онлайн..

Вы анонимный пользователь.


Language of interface
Выберите язык интерфейса:


Log in
 





Регистрация


 

Комплекты реактивов для биолюминесцентнго анализа (КРАБы)
.: Дата публикации 11-Янв-2005 :: Просмотров: 1152 :: Печатать текущую страницу :: Печатать все страницы:.
Untitled Document
 

В лаборатории бактериальной биолюминесценции разработаны методики получения высокоочищенной люциферазы из разных видов светящихся бактерий, в том числе из рекомбинантного штамма E.coli, несущего гены бактериальной биолюминесценции Lux A и Lux B. (патент №20730714) и технология получения комплектов реактивов для биолюминесцентного анализа (КРАБов) из ферментов люминесцентной реакции бактерий – люциферазы и НАДН-ФМН-оксидоредуктазы.

Комплект Реактивов для Аналитической Биолюминесции (КРАБ)

Комплект реактивов для биолюминесцентного анализа К Р А Б:

ИЗГОТОВЛЕН из высокоочищенных бактериальных ферментов люциферазы, НАД(Ф)Н ФМН -оксидоредуктазы.

АНАЛИЗ основан на измерении интенсивности свечения, которое является следствием двух сопряженных реакций:

оксидоредуктаза
1. ФМН + НАД(Ф)Н + H+ ————————————› НАД(Ф)+ + ФМН H2

люцифераза
2. ФМН Н2 + RСНО + O2 ——————————›ФМН + RCOOH + H2O + hv

КРАБ ПРЕДНАЗНАЧЕН:

- для измерения активности ферментов, окисляющих и восстанавливающих НАД(Ф)Н и их субстратов. Метод отличается высокой чувствительностью и точностью;

- для количественного определения НАД(Ф)Н, ФМН и его аналогов, алифатических альдегидов;

- для определения протеолитической активности ферментов и биологических жидкостей. Тестируются нанограммные количества протеаз и антипротеаз. Время анализа 2-3 минуты;

- для тестирования токсинов, наркотиков и других веществ, ингибирующих свечение.

КРАБ МОЖЕТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАН:

- в биохимии;

- в практике клинических лабораторий;

- в технической микробиологии, при контроле окружающей среды.

ОДИН КОМПЛЕКТ реактивов рассчитан на 500-4000 измерений в зависимости от вида анализа. При соблюдении условий хранения стабильность основных характеристик гарантируется в течение года.

Корреляция между интенсивностью люминесценции и концентрацией НАДН, характеризующая высокую чувствительность КРАБа

При использовании комплектов реактивов для биолюминесцентного анализа разными исследователями разработан целый ряд методик (Кратасюк В.А., Гительзон И.И. Использование светящихся бактерий для биолюминесцентного анализа. Успехи микробиологии. 1987.. –т.21. –С.3-30. В работе (Воеводина Т.В., Нифантьев О.Е., Ковалевский А.Н., Шульц В.П., Кратасюк В.А. Изучение степени интоксикации больных при перитоните. Лаб. дело.-1990. №9), представлены результаты оценки степени интоксикации больных перитонитом. В Институте медпроблем народов Севера разработаны методики количественного определения активности ферментов в лимфоцитах крови (Савченко А.А., Сунцова Л.Н.//Лаб.дело.-1989.-№ 11.-С.23-25). В частности, определяется активность ферментов: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, глицерол-3-фосфатдегидрогеназы, прямой и обратной реакции лактатдегидрогеназы, прямой и обратной реакции малатдегидрогеназы, маликфермента, НАДФ- и НАД-зависимых глутаматдегидрогеназ, (НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ, глутатионредуктазы (ГР), пируватдегидрогеназного комплекса и 2-оксоглутаратдегидрогеназного комплекса. Эти методы привлекаются для оценки функциональной активности иммунокомпетентных клеток при аутоиммунных патологиях (Савченко А.А., Россиев Д.А., Догадин С.А., Митрошина Л.В.//Патол.физиол. и эксперим.терапия.-1996.-№ 3.-С.28-32; Савченко А.А., Шакина Н.А., Россиев Д.А.//Вопр.мед.химии.-1998.-Вып.3.-С.267-273.).

 
.: Вернуться в документ Наши разработки :: Вернуться в меню Документов :.
 

Laboratory of Bacterial Bioluminescence © 2004-2013
This site is supported by a grant № 05-07-90157b from the Russian Foundation for Basic Researches
Insitute of Biophysics SB RAS

Яндекс цитирования